方法很多，其中可以用活的或死的梅毒螺旋體或其成分來作抗原測定抗螺旋體抗體，這種試驗敏感性和特異性均高，一般用作證實試驗。這種試驗是檢測血清中抗梅毒螺旋體IgG抗體，即使患者經過足夠治療，仍能長期存在，甚至終身不消失，血清反應仍持續存在陽性。
晚期梅毒血清試驗方法現在一般爲以下兩個方法：
1、非梅毒螺旋體抗原血清試驗：用心磷脂做抗原，檢查血清中的抗心磷脂脂抗體，即反應素，屬於這一類的試驗的VDRL試驗，UST試驗及RPR試驗，這些試驗方法簡便，易於推廣，是臨牀常用的常規試驗，也可在大規模普查時用，此外這些試驗均可作定量測定，可用於觀察療效，判斷是否復發及再感染，但應注意由於試驗用的抗原是非特異性的，因而容易出現假陽性結果，一些傳染病如病毒性肝炎，麻疹，上呼吸道感染，活動性肺結核，自身免疫病時均可出現假陽性結果，但血清反應的滴度低，持續時間一般較短。
2、梅毒螺旋體特異性抗原血清試驗：用活的或死的梅毒螺旋體或其成份來測抗螺旋體抗體，屬於這一類的試驗有熒光螺旋體吸收試驗;梅毒螺旋體血凝試驗：這類試驗的特異性強，可用作證實試驗，但不能用作觀察療效，判斷復發及再感染。
